實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>此次實(shí)驗(yàn)樣品為小鼠肝臟細(xì)胞核,為后續(xù)更好的破碎打斷細(xì)胞核樣品,此次實(shí)驗(yàn)選用上海凈信科研者的高通量聲波基因組剪切儀 JXDNA-500PICO前處理設(shè)備,對(duì)小鼠肝臟細(xì)胞核樣品進(jìn)行超聲破碎實(shí)驗(yàn)應(yīng)用。
高通量聲波基因組剪切儀采用等溫、非接觸的方式對(duì)樣品進(jìn)行打斷、勻漿和混合;主要用于細(xì)菌細(xì)胞破碎,蛋白質(zhì)抽提、二代測(cè)序樣本 DNA 片段化、免疫共沉淀等實(shí)驗(yàn)。聲波基因組剪切儀具有聲波聚焦,高效率低能耗、實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好、得率高等優(yōu)勢(shì);采用4℃低溫水浴超聲波,能量分布均勻超聲作用完全。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
1.將冷水機(jī)注滿純水,做實(shí)驗(yàn)之前先打開(kāi)冷水機(jī)進(jìn)行預(yù)冷。
2.剪切儀主機(jī)電源打開(kāi),讓水保持循環(huán)狀態(tài)直到4℃之后方可使用?! ?/p>
3.達(dá)到預(yù)定溫度之后,即可設(shè)置超聲功率、超聲時(shí)間?! ?/p>
4.將樣品管以對(duì)稱形式放入適配器中?! ?/p>
5.超聲模式設(shè)為間歇超聲,超聲20s,間歇10s?! ?/p>
6.剪切儀使用完畢后,關(guān)閉冷水機(jī)與剪切儀電源,并將適配器擦干后安全放置。
實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
1.每周至少換一次純水。
2.儀器運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)不可用外力強(qiáng)迫適配器旋轉(zhuǎn)馬達(dá)停止?! ?/p>
3.超聲水槽內(nèi)要保證有水才可以啟動(dòng)超聲,不可無(wú)水超聲。
4.冷水機(jī)的第一次開(kāi)機(jī)設(shè)定溫度是4℃,后期使用無(wú)需再次設(shè)置,打開(kāi)電源即可。
5.超聲波水槽不可用尖銳物品碰觸或刮擦,不可加入高鹽或腐蝕性液體。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:實(shí)驗(yàn)超聲打斷結(jié)果良好
超聲波破碎在分子生物學(xué)中一直被廣泛使用,高通量聲波基因組剪切儀則進(jìn)一步提高了超聲波破碎的效率和準(zhǔn)確性,使得研究人員能夠獲得更高質(zhì)量的基因組數(shù)據(jù)。這些高質(zhì)量的基因組數(shù)據(jù)對(duì)于生物科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究具有重要意義。高通量超聲波基因組剪切儀一次能夠處理30個(gè)樣品,這對(duì)于那些需要處理多個(gè)樣品或貴重樣品的研究人員來(lái)說(shuō),無(wú)疑是一個(gè)巨大的福音。且不需要使用昂貴的化學(xué)試劑和耗材,大大降低了實(shí)驗(yàn)成本。