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　　在單細胞轉(zhuǎn)錄組測序?qū)嶒灢僮髦?，很多都是需要從各種生物樣本細胞中制備細胞懸液；而針對不同的生物樣本類型，如何獲取到活性高、完整性好、結(jié)團率低的單細胞懸液，這是單細胞實驗成功的關鍵。那對于小鼠肝腎脾樣品的細胞懸液實驗操作該如何進行呢？

　　實驗設備：單細胞懸液制備儀 JX-CKSM-48WK

　　小鼠肝腎脾樣品的細胞懸液制備實驗過程：

　　1.打開儀器開關，打開加熱模塊，加熱

　　2.取活體組織后，放入PBS液中去紅，然后取20-50mg，分成6-8等分

　　3.用移液器把消化酶加入2ml的研磨套裝管中，將加滿消化酶的離心管放入預熱模塊中預熱3-5分鐘

　　4.將處理好的組織用鑷子轉(zhuǎn)移到加滿消化酶的離心管中

　　5.將裝有消化酶和組織的離心管放置到加熱板中，選擇25分鐘程序，開始運行

　　6.程序結(jié)束取出離心管，將消化好的組織液轉(zhuǎn)移到過濾管中，即得到一管單細胞懸液

　　小鼠肝腎脾樣品細胞懸液制備實驗前后對比效果圖：

　　樣品懸液制備的實驗注意事項

　　1、消化酶和終止液均需要在冷凍環(huán)境下保存。

　　2、消化酶解凍時需在常溫條件下解凍，不可以放入水浴或者其他加熱儀器中解凍，溫度升高對酶的活性會有很大的影響。

　　從新鮮組織中制備高活性和高質(zhì)量的單細胞懸液是單細胞轉(zhuǎn)錄組測序至關重要的一步，很多單細胞實驗折戟在此。常見的問題諸如細胞活性低，細胞背景不干凈，細胞碎片多，細胞結(jié)團率高等?？蒲姓邌渭毎麘乙褐苽鋬x具有組織高利用率、單細胞化過程高效、細胞活性高的特點，常應用于流式細胞術(shù)/單細胞測序/原代細胞培養(yǎng)等實驗。